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椴树组织培养研究

标题: 椴树组织培养研究
作者: 吕校石
出版时间: 2004-01-01
所在大学: 河北农业大学
关键词: 椴树,再生体系,增殖,生根,移栽
论文级别: 硕士
学位: 学位论文
导师: 杨建民
专业: 森林培育
提交时间: 2004
摘要: 该文利用组织培养技术建立了引进的彩叶椴树金叶椴,皇帝椴和紫椴、蒙椴,糠椴的再生体系.主要从外植体的消毒和选择、基本培养基的应用、外源激素的使用浓度、影响试管苗生根的主要因子以及试管苗的移栽等几个方面进行了探讨,确定了最佳再生途径.主要结果如下:1污染控制;椴树的茎尖对升汞敏感,出现腋芽坏死现象.以安替福民、青霉素、链霉素,84消毒液为消毒剂进行了一系列的消毒实验,结果表明:84消毒液对外植体的消毒效果优于安替福民.以10%的84消毒液处理种子30min或15%的84消毒液处理种子20min或以15%的84消毒液处理茎尖30min,效果最佳,污染率均为0.用320万单位/L的青霉素+160万单位/L的链霉素浸泡35min,或用480万单位/L的青霉素+160万单位/L的链霉素浸泡水培苗30min控制细菌污染,效果最佳.2胚的培养;以半成熟的种子为组培材料,不仅利于操作,而且有利于胚的生长.在保定市区,应在8月5日左右;白石山山区,则在9月1日左右采集紫椴种子.较适宜的培养基为MS+0.5mg/LKT+0.05mg/LNAA+2.0mg/LGA<,3>.KT的适宜浓度为0.5mg/L,高于或低于这个浓度都影响胚的生长.3茎尖的启动;茎尖的质量和取材的时间是启动成败的重要因素.应采取当年生半木质化嫩茎或萌蘖为材料,不仅利于启动,又利于茎尖的生长和分化;在取材的时间上,以4~5月份最佳,6~7月份也较理想.不同的基因型,其启动率不一样.紫椴、蒙椴>皇帝椴>金叶椴、糠椴.较适宜椴树启动的培养基为MCM+1.0mg/LBA+0.1mg/LNAA.4增殖培养和褐变控制;椴树的增殖的基本方式是以通过种胚获得的无菌苗和茎尖启动获得的腋芽进行继代培养,以获得最高的繁殖系数,通过控制培养基中分裂速度浓度来完成对读数试管苗生长状况的调控.实验表明:在紫椴、蒙椴增殖培养中,BA对茎尖的生长和分化表现稳定,其中以WPM+0.05mg/LBA+2.0mg/LGA<,3>+0.05mg/LNAA培养基中茎尖的增殖系数较高,苗生长旺盛,茎粗叶大,且成本较低.ZT对椴树茎尖的生长和分化与BA没有明显的差异,且成本较高.在金叶椴增殖培养中,TDZ表现出很强的促进分化和增殖生长能力.其中以WPM+0.05mg/LZT+2.0mg/LGA<,3>+0.5mg/LNAA培养基中茎尖的增殖系数最高.引起褐变现象的因子是多方面的,试验过程中,在培养基中加入0.1 mg/L活性炭+0.1PVP或1.0g/L硫代硫酸钠+0.1g/L活性炭有效地抑制椴树褐变的发生.5生根培养和移栽;影响试管苗的生根因素很多,比较各种激素种类和浓度对椴树试管苗的生根影响.实验结果表明:椴树试管苗直接诱导生根效果较差;该用二步生根法效果理想,其中以1/2MS+150mg/LIBA+50mg/LNAA诱导3d再转入生根培养基中生根效果最佳:紫椴和糠椴的生根率为100%,檬椴的生率为90.0%,金叶椴的生根率为84.0%,根质量高,粗壮、亮白色、生长迅速,无侧根.