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水稻蛋白激酶的克隆及体外表达

标题: 水稻蛋白激酶的克隆及体外表达
作者: 刘茜
出版时间: 2005-01-01
所在大学: 河北农业大学
关键词: 水稻,蛋白激酶,克隆,酵母
论文级别: 硕士
学位: 学位论文
导师: 李莉云%刘国振
专业: 植物学
提交时间: 2005
摘要: 本研究利用已公布的水稻蛋白激酶序列,用Sequencher软件设计引物,用PCR方法从水稻种子cDNA文库中扩增水稻蛋白激酶的编码序列,克隆于酵母表达载体pEGH上,在酵母Y258菌株中进行自重组,重组体转入大肠杆菌并经过酶切鉴定和测序确认后,再转入酵母菌宿主中诱导表达蛋白激酶,继而对纯化的蛋白质进行SDS-PAGE检测。结合生物信息学方法,对蛋白激酶核苷酸序列进行分析,并对其功能进行预测。 本试验得到了5个水稻蛋白激酶,经过测序及序列相似性分析,证明这5个激酶就是目的蛋白激酶,它们可能在水稻种子发育过程中起着多方面的作用。本试验初步建立了小规模克隆与表达水稻蛋白激酶的技术体系,为规模化的克隆水稻蛋白激酶打下基础,也为其它功能基因的研究提供参考。