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苹果叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选

标题: 苹果叶盘法基因转化中抗生素种类和浓度的筛选
英文标题: THE SELECTION OF ANTIBIOTICS AND THEIR CONCENTRATION DURING GENE TRANSFORMATION VIA LEAF DISC REGENERATION SYSTEM IN APPLE
作者: 张丽丽,师校欣,杜国强,冯莎莎,张俊阁
英文作者: ZHANG LILI,SHI XIAOXIN,DU GUOQIANG,FENG SHASHA,ZHANG JUNGE
出版时间: 2006-01-01
机构: 河北农业大学
关键词: 苹果,基因转化,农杆菌,抗生素
刊名: 中国农学通报
英文刊名: CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
ISSN: 1000-6850
卷号: 010
基金: ^A河北省自然科学基金^BC2005000192^D1%^A河北省自然科学基金^BC2006000451^D2%^A河北农业大学校科研和教改项目^B^D3
页码: 80-84
分类号: S6
摘要: 以苹果品种嘎拉试管苗为试材,研究了卡那霉素(KM)、潮霉素(HM)对继代苗生长和离体叶片再生的影响,以确定叶盘法基因转化的选择压和转化体的筛选浓度;同时研究了不同浓度的头孢霉素(CEF)和羧苄青霉素(CARB)对苹果离体叶片再生的影响及对农杆菌EHA105和LBA4404的抑菌效果;以确定侵菌共培养后合适的抑菌抗生素种类和浓度.结果表明:KM10MG/L、HM4.0 MG/L完全抑制了叶片不定芽的分化,可作为苹果叶盘法转化时抗性芽的选择压;KM 50MG/L、HM5.0 MG/L达到继代苗的半致死浓度,可作为转化后抗性苗的筛选浓度;由于抗性芽再生的选择压与抗性苗筛选浓度相差较小,HM相对于KM更适合作为苹果基因转化的选择标记;培养基中附加CEF300MG/L能完全抑制农杆菌生长,对叶片不定芽的再生影响不大;而附加CARB则需400MG/L以上才能抑制农杆菌生长,同时严重抑制了叶片再生.因此,宜选用CEF作为苹果基因转化的抑菌抗生素.