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大豆胚尖遗传转化体系优化及抗逆基因GmPK转化研究

标题: 大豆胚尖遗传转化体系优化及抗逆基因GmPK转化研究
英文标题: Optimizing Genetic Transformation System of Soybean Embryonic Tips and Transformation of Stress Resistance Gene GmPK
作者: 张洁,商蕾,郑文永,邱丽娟,王冬梅
英文作者: ZHANG Jie1,SHANG Lei 1,ZHENG Wen-yong 1,QIU Li-juan 2,WANG Dong-mei(1 College of Life Science,Agticultural University of Hebei,Baoding 071000,2 Institute of Crop Sciences,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081)
出版时间: 2012-01-01
机构: 河北农业大学
关键词: 大豆,胚尖,遗传转化,根癌农杆菌,GmPK基因
英文关键词: Glycine max,Embryonic tips,Genetic transformation,Agrobacterium tumefaciens,GmPK gene
刊名: 植物遗传资源学报
英文刊名: Journal of Plant Genetic Resources
ISSN: 1672-1810
卷号: 002
基金: ^A河北省科技攻关计划项目^B042401116D-1^D1%^A河北省科学技术研究与发展计划项目^B09220103D^D2%^A河北省教育厅项目^B2008460^D3%^A转基因生物新品种培育重大专项^B2008ZX08004-002-1-5;2009ZX08004-001B^D4
页码: 271-277
分类号: S565.1
摘要: 采用GUS基因瞬时表达检测方法,通过正交试验以AS浓度、侵染菌液OD值、侵染时间、共培养时间和恢复培养时间5个因素在4个水平上进行分析,优化了农杆菌介导的大豆胚尖遗传转化体系,并在此基础上进行了抗逆基因GmPK的遗传转化.结果表明,采用共培养培养基中添加100μmol/L AS、侵染菌液OD600值0.9、侵染15h、共培养5d和恢复培养3d的转化条件最佳,GUS阳性率达74.59%,经PCR及RT-PCR进一步验证获得了转基因阳性植株.利用优化的最佳条件进行抗逆基因GmPK的转化,炼苗移栽成活的再生植株经PCR及PCR-Southern blotting验证,初步证明外源基因已经整合至大豆基因组,转化率为0.6%.