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玉米大斑病菌ATMT突变体库的构建及其分析

标题: 玉米大斑病菌ATMT突变体库的构建及其分析
英文标题: Constuction and Evaluation of ATMT Mutant Library of Setosphaeria turcica
作者: 王梅娟,李坡,吴敏,范永山,谷守芹,董金皋
英文作者: WANG Mei-juan1,LI Po1,2,WU Min1,FAN Yong-shan3,GU Shou-qin1,DONG Jin-gao1(1Molecular Plant Pathology Laboratory,Agricultural University of Hebei,Baoding 071000,Hebei,2Plant Protection Institute,Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences,3Department of Life Sciences,Tangshan Teachers' College,Tangshan 063000,Hebei)
出版时间: 2012-01-01
机构: 河北农业大学
关键词: 玉米大斑病菌,ATMT,突变体库,T-DNA插入突变体
英文关键词: Setosphaeria turcica,ATMT,mutant library,T-DNA insertion mutant
刊名: 中国农业科学
英文刊名: Scientia Agricultura Sinica
ISSN: 0578-1752
卷号: 012
基金: ^A国家自然科学基金^B30471126,31171805^D1%^A河北省自然科学基金^BC2009000622,C2010001854^D2
页码: 2384-2392
分类号: S435.131.4
摘要: [目的]利用农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化技术,对玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)进行转化,构建ATMT突变体库,为从分子水平上揭示病菌的致病机理奠定基础.[方法]以带有重组双元载体的农杆菌对玉米大斑病菌进行转化,利用潮霉素B进行筛选,对抗性稳定的转化子进行PCR检测,构建玉米大斑病菌ATMT突变体库;从突变体库中随机选取一定数量的突变体,对其菌落形态、菌丝及分生孢子发育、致病性等进行分析.[结果]获得了1265株玉米大斑病菌T-DNA插入突变体;从中随机选取36株突变菌株,对其进行抗性筛选和PCR检测,发现潮霉素磷酸转移酶基因已整合进入野生型菌株的基因组中,且能够稳定遗传;与野生型菌株相比,在供试的菌株中,大部分菌株菌落形态和生长速率没有发生明显改变.生长速率明显减慢的菌株占总数的13.8%,明显加快的菌株占16.7%;发现了2株分生孢子形态发生明显改变的菌株,占菌株总数的5.6%;产孢量明显增大的菌株占5.6%,产孢量减少的菌株占13.5%;分生孢子萌发率发生明显改变的菌株占16.6%;发现了1株致病性明显增强的菌株,占菌株总数的2.8%.[结论]构建了玉米大斑病菌ATMT突变体库,并对突变体库进行了初步分析,将为克隆玉米大斑病菌生长发育和致病性相关基因奠定基础.