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双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达

标题: 双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达
英文标题: TRANSFORMATION AND EXPRESSION OF TWO INSECT-RESISTANT GENES TO HYBRID TRIPLOID OF CHINESE WHITE POPLAR
作者: 杨敏生,李志兰,王颖,王进茂,梁海永
英文作者: YANG MINSHENG,LI ZHILAN,WANG YING,WANG JINMAO,LIANG HAIYONG
出版时间: 2006-01-01
机构: 河北农业大学
关键词: 三倍体毛白杨,双抗虫基因,遗传转化,抗虫性
刊名: 林业科学
英文刊名: SCIENTIA SILVAE SINICAE
ISSN: 1001-7488
卷号: 009
页码: 61-68
分类号: S722.3+6
摘要: 建立三倍体毛白杨叶片再生体系,用部分改造BTCRY1AC基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法转化三倍体毛白杨无性系,在含卡那霉素50 MG·L-1的分化培养基上诱导产生不定芽的叶片占18%,在生根培养基上对转基因植株做进一步筛选,获得50个转化再生株系.PCR检测表明:80%的植株呈现阳性反应,部分株系进行SOUTHERN BLOT检测,证明外源基因已经插入杨树基因组中.用BT毒蛋白抗血清进行ELSA检测,结果表明:7个转基因株系都有BT杀虫蛋白表达,表达量最高的株系约占叶总可溶性蛋白的0.016 1%.用经分子生物学检测的28个转基因株系叶片进行舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫饲虫试验,结果表明:不同株系幼虫杀死率明显不同,有39.3%的株系对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫的致死率在80%以上;25.0%的株系对两种害虫的幼虫死亡率均在60%~80%之间;另有35.7%的株系幼虫死亡率在50%以下,有些株系基本未表现出抗虫性.同时具高抗虫性的转基因株系能够明显抑制存活幼虫的生长和发育.