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小麦抗叶锈病LR35基因同源序列RGA1侧翼序列的扩增与分析

标题: 小麦抗叶锈病LR35基因同源序列RGA1侧翼序列的扩增与分析
英文标题: AMPLIFICATION AND ANALYSIS OF HOMOLOGY RGA1 FLANKING SEQUENCE OF WHEAT LEAF RUST RESISTANCE GENE LR35
作者: 王海燕,姜亚博,杨文香,刘大群,张汀
英文作者: WANG HAIYAN,JIANG YABO,YANG WENXIANG,LIU DAQUN,ZHANG TING
出版时间: 2006-01-01
机构: 河北农业大学
关键词: 小麦抗叶锈病基因,LR35,TAIL-PCR,克隆
刊名: 分子植物育种
英文刊名: MOLECULAR PLANT BREEDING
ISSN: 1672-416X
卷号: 003
基金: ^A国家自然科学基金^B30170602^D1%^A河北农业大学校科研和教改项目^B^D2%^A中国发展研究基金^B2005CCA01600^D3
页码: 329-332
分类号: S4
摘要: 利用小麦抗叶锈病近等基因系材料TCLR35,根据已扩增出的LR35相关基因组DNA片段RGA1设计3对特异性引物,通过热不对称交错PCR技术获得2个有效扩增片段,将目的片段回收纯化,连接到PGEM-T EASY载体,转化ECOLI DH5α感受态细胞中,经ECOR Ⅰ酶切,验证插入片段,选择合适菌液测序.获得了2条侧翼序列,长度分别为511BP和614BP,与RGA1重叠区分别为293BP和509BP,分别向3''端和5''端延长了208BP和100BP,拼接后序列为915BP.经BLASTN同源性比较与小麦抗叶锈病基因LR21同源性为93%(SCORE值为674,E值为0.0),与含有LR10基因的450KB大片段重叠群同源性为90%(SCORE值为260,E值为7E-66),该研究为克隆LR35目的基因奠定了基础.