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农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化体系优化

标题: 农杆菌介导的大豆子叶节非组织培养遗传转化体系优化
英文标题: Optimization of the Agrobacterium-Mediated Genetic Transformation System of Soybean Cotyledonary Node With Non Tissue-Culture
作者: 李丹丹,张洁,刘娜,陈琰,韩胜芳,王冬梅
英文作者: LI Dan-dan,ZHANG Jie,LIU Na,CHEN Yan,HAN Sheng-fang,WANG Dong-mei(College of Life Sciences,Agricultural University of Hebei,Baoding071001)
出版时间: 2012-01-01
机构: 河北农业大学
关键词: 大豆,子叶节,非组织培养,遗传转化,草铵膦筛选
英文关键词: Soybean,Cotyledonary node,Non tissue-culture,Genetic transformation,Glufosinate screening
刊名: 植物遗传资源学报
英文刊名: Journal of Plant Genetic Resources
ISSN: 1672-1810
卷号: 005
基金: ^A河北省科技攻关计划项目^B042401116D-1^D1%^A转基因生物新品种培育重大专项子课题^B2008ZX08004-002-1-5;2009ZX08004-001B;2011ZX08004-002-002^D2
页码: 789-797
分类号: S565.1
摘要: 本研究以GUS基因在子叶节区的瞬时表达为依据,通过探讨影响农杆菌转化效率的因素,优化了大豆子叶节非组织培养遗传转化体系;利用该体系对冀豆16号进行Bar基因的遗传转化,并使用针刺法对转基因植株进行草铵膦筛选.结果表明,侵染液中附加3%蔗糖、OD600=0.6、以脱脂棉作为菌液附着介质同时不添加表面活性剂Silwet L-77、侵染1次的GUS阳性率最高达到62.13%.草铵膦抗性植株经PCR检测获得T0阳性植株10个,转化率为2.5%.经PCR和RT-PCR鉴定共获得3株T1阳性植株,初步证明目的基因已整合到大豆基因组中.