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油松cDNA SRAP-PCR反应体系的建立与优化  

标题: 油松cDNA SRAP-PCR反应体系的建立与优化  
作者: 刘洋,高宝嘉,张斌,陈明叶
出版时间: 2016-01-01
机构: 河北农业大学林学院
关键词: 油松,正交设计,cDNA-SRAP,体系优化
刊名: 《分子植物育种》
期号: 7
页码: 1737-1743,共7页
分类号: S791.254
是否SCI: 0
是否EI: 0
是否核心: 0
摘要: 为了建立油松cDNA SRAP-PCR反应体系,利用正交设计L16(45)对PCR反应体系的Taq酶、模板cDNA、引物、Mg2+、d NTP这五个因素在四个水平上进行优化。使用SPSS软件对PCR结果结合方差分析和直观分析。结果表明:不同因素水平的变化对SRAP-PCR反应的影响大小依次为d NTP>模板c DNA>Taq酶>引物>Mg2+。筛选各因素最佳水平,油松c DNA SRAP-PCR最佳反应体系(20μL):Taq酶2 U,c DNA模板用量80120 ng,引物浓度0.4μmol/L,Mg2+浓度1.5 mmol/L,d NTP浓度0.2 mmol/L。这一优化体系的建立有助于今后利用cDNA-SRAP技术对油松进行基因表达差异的分析。